Федеральное
государственное бюджетное учреждение
"Научный центр акушерства,
гинекологии и перинатологии имени академика
В.И. Кулакова"
Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации
С 1985 года в отделении вспомогательных технологий в лечение бесплодия разработаны и внедрены в практику все этапы, алгоритмы и методики лечения всех форм мужского и женского бесплодия с помощью экстракорпорального оплодотворения, донации яйцеклеток, оплодотворения яйцеклетки одним сперматозоидом (микроинъекция), селекции (выбор) пола, предимплантационной генетической диагностики, лапароскопических операций.
Впервые в мире ребенок, зачатый в пробирке, появился на свет в Англии в 1978 году. Метод был быстро подхвачен в других странах (Австралия, США, Европа). В настоящее время с помощью этого метода зачато более 1 млн. детей. Ввести в практику здравоохранения этот метод удалось английскому эмбриологу, проф. Р.Эдвардсу и акушеру-гинекологу П.Стептоу.
В России первый ребенок ЭКО был зачат in vitro в лаборатории клинической эмбриологии нашего Центра в 1985 году.
К настоящему времени только в Центре родилось более 17 000 детей. Дети после лечения методом ЭКО и искусственной инсеминации - это самые любимые и долгожданные дети на свете. И в том, чтобы Вы обрели счастье и радость отцовства и материнства, мы видим основную цель нашей работы.
Метод ЭКО состоит из следующих этапов:
Проведение стимуляции суперовуляции различными препаратами, под действием которых в яичниках созревает не одна-две яйцеклетки, как в естественном менструальном цикле, а сразу 5 – 10.
С целью получения яйцеклеток из фолликулов яичников производится трансвагинальная пункция яичников под УЗИ контролем. Пункция длится 5 – 10 минут под внутривенным наркозом, абсолютно безболезненно.
Оплодотворение яйцеклеток со спермой происходит в первые сутки в специальном термостате со специальными условиями (температура, газовый состав, стерильность). При низкой концентрации сперматозоидов производится интрацитоплазматическая инъекция выбранных сперматозоидов хорошего качества в цитоплазму яйцеклеток с помощью специального аппарата – манипулятора.
На 3 или 5-е сутки производится выбор лучших эмбрионов (не более 2-х) и перенос их в полость матки женщине с помощью специального очень тонкого и гибкого катетера. Эта манипуляция безболезненна.
В течение 14 - 16 дней рекомендуется поддерживающая терапия, которую можно проводить по месту жительства, по окончанию которой проведение теста на беременность – в моче или определение уровня бетта-хг в крови укажет на полученный результат.
Дальнейшая тактика ведения должна быть обсуждена с лечащим врачом, как при положительном, так и при отрицательном результате.
Процедура проведения ИКСИ – интрацитоплазматической инъекции сперматозоида в ооцит
В данном ролике представлена стандартная процедура проведения ИКСИ – интрацитоплазматической инъекции сперматозоида в ооцит, используемая в отделении вспомогательных технологий в лечении бесплодия ФГУ «НЦ АГиП им. В.И. Кулакова» Минздравсоцразвития России. Данная методика оплодотворения используется у пар с мужским фактором бесплодия, при отсутствии оплодотворения в предыдущих попытках ЭКО, при использовании в программе ооцитов или сперматозоидов после процедуры криоконсервации, а также на основании заявления пациентов.
Первая стадия процесса заключается в выборе прогрессивно подвижного, морфологически нормального сперматозоида, в головке которого отсутствует видимая вакуолизация (при подозрении на наличие вакуолей в головке сперматозоида проводится более тщательное исследование при большем увеличении (ИМСИ)).
Для оценки качества сперматозоида используется оптическое и аппаратное увеличение наряду с методами прижизненного контрастирования биологических объектов. Далее выбранный сперматозоид обездвиживается и переносится в каплю среды, в которой находится зрелый ооцит.
На второй стадии при помощи микроинструментов ооцит фиксируется таким образом, чтобы полярное тело находилось на 6 или 12 часах. После этого производится прорыв мембраны ооцита и введение в него обездвиженного сперматозоида.
После проведения данной манипуляции клетки возвращают в питательную среду, и дальнейший процесс их культивирования не отличается от протокола ЭКО до момента переноса эмбрионов в полость матки пациентки.
Обследование перед программой ЭКО включает:
Рентгеновские снимки матки и труб (по показаниям)
Гормоны крови:
на 2 - 7 день менструального цикла:
- ЛГ, ФСГ, эстрадиол, ТТГ, Т4св, АТ-ТГ, АТ-ТПО, ДГА-С
- пролактин, СТГ, кортизол, тестостерон – по показаниям
Исследование на хронические инфекции:
- ПЦР: хламидии, микоплазмы, уреаплазма.
Анализ крови на:
- ВПГ, ЦМВ, токсоплазмоз, краснуха (со стадией заболевания).
Мазок на степень чистоты из влагалища.
Бак. посев на флору из влагалища и шейки матки
Кольпоскопия, мазок на онкоцитологию.
УЗИ органов малого таза на 5 - 8 день цикла (только Центр).
УЗИ щитовидной железы – по показаниям.
Маммография или УЗИ молочных желез – по показаниям.
Анализ крови на RW, ВИЧ, гепатиты В и С /оба супруга/ (только Центр).
Группа и резус-фактор крови (только Центр).
Клинический анализ крови.
Биохимический анализ крови:
- глюкоза, холестерин, общий белок, креатинин, билирубин общий, мочевина, АСТ, АЛТ, ГГТ, ЛДГ.
Гемостазиограмма (свертываемость крови).
Общий анализ мочи.
ЭКГ.
Флюрография.
Консультация врача-терапевта (только Центр).
Консультация генетика (по показаниям).
Спермограмма мужа.
Консультация врача-андролога (только Центр).
ЭКО не следует рассматривать, как разовый курс лечения со 100 % эффективностью, к сожалению, даже в лучших клиниках мира результативность этого метода не превышает 50 - 55 % на одну попытку.
Эндометрий-рецепторы-пиноподии
Одной из возможных причин неудач в программе экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбриона (ЭКО и ПЭ) является нарушение процессов имплантации (прикрепления эмбриона к эндометрию). Для обеспечения успешной имплантации и развития эмбриона огромное значение имеет структура эндометрия, в частности содержание в нем прогестероновых и эстрогеновых рецепторов, а также пиноподий – выростов на поверхности эндометрия, к которым непосредственно прикрепляется эмбрион. Циклическое развитие эндометрия обеспечивают основные женские половые гормоны – эстрадиол и прогестерон, которые действуют на слизистую оболочку матки через собственные рецепторы. При нарушении содержания рецепторов в эндометрии и низком количестве пиноподий, даже при нормальных уровнях гормонов в крови, не происходит достаточного развития эндометрия и эмбрион не может прикрепится к матке. К сожалению, у женщин, идущих на ЭКО, именно эндометрий и бывает слабым звеном.
В настоящее время появился новый метод диагностики состояния эндометрия, позволяющий определить полноценность его развития и способность обеспечить адекватное развитие эмбриона в полости матки, а также, при необходимости, подобрать индивидуальную программу подготовки эндометрия к последующей попытке ЭКО.
Данный метод основан на комплексном изучении эндометрия, включающем гистологическое исследование, определение содержания прогестероновых и эстрогеновых рецепторов и количества пиноподий.
Для проведения данного исследования нет необходимости прибегать к болезненной и травматичной процедуре выскабливания эндометрия, требующей кратковременного наркоза. С целью получения материала для исследования, используется так называемая, аспирационная пайпель-биопсия эндометрия с помощью гибкого пластмассового катетера диаметром 3 мм с боковым отверстием на конце. Процедура занимает около 40 секунд, не требует госпитализации в стационар, обезболивания пациентки и расширения цервикального канала.
После получения результатов гистологического исследования при условии нормального ответа в следующем менструальном цикле можно проводить ЭКО и планировать беременность. При выявлении каких-либо отклонений от нормы, проводится дополнительная подготовка, которая занимает 2-3 месяца.
Электронно-микроскопическое исследование сперматозоидов (ЭМИС)
Основным методом первичной диагностики мужского бесплодия является традиционный метод спермиологического обследования, позволяющий поставить предварительный диагноз и наметить пути дальнейшего обследования больных. Определение количества сперматозоидов, характеристика их подвижности и морфологических свойств дает общие представления об оплодотворяющей способности спермы, однако не все аномалии сперматозоидов, влияющие на оплодотворение и развитие эмбриона, различимы при светооптической микроскопии Метод количественного электронно-микроскопического анализа сперматозоидов человека (ЭМИС) позволяет выявлять первичный или вторичный характер нарушения фертильности, связь нарушения фертильности с генетическими аномалиями либо с действием экзогенных факторов. На основании анализа результатов электронно-микроскопических исследований сперматозоидов большой группы фертильных мужчин получены количественные данные о том, какие аномалии сперматозоидов совместимы с фертильностью.
Исследования сперматозоидов методом ЭМИС, проводимые в отделении вспомогательных технологий в лечении бесплодия нашего Центра, направлены на последующее включение супружеских пар в программы ЭКО/ИКСИ и адаптированы под успешное проведение этих программ. В исследование входят: первичная консультация врача-андролога, светооптическая микроскопия (спермограмма), расширенное исследование сперматозоидов методом ЭМИС для программ ВРТ (для исследования отбираются только морфологически нормальные сперматозоиды, пригодные для оплодотворения по критериям Крюгера), повторная консультация андролога и назначение курса лечения по результатам анализа, контрольное исследование сперматозоидов. Назначаемые в отделении ВРТ в лечении бесплодия по результатам ЭМИС схемы лечения рассчитаны на максимально короткие сроки (от 14 до 30 дней), что позволяет не откладывать проведение программ ВРТ. Применяемые в отделении курсы по улучшению качества спермы при патоспермии высокоэффективны и рассчитаны на последующее проведение программ ЭКО (патент на изобретение № 2205047).
Показаниями к проведению ЭМИС являются:
отсутствие беременности в супружеской паре на протяжении многих лет
спонтанные аборты на сроке до 8 недель
неудачное проведение программ ЭКО
С помощью ЭМИC возможно:
выявлять аномалии сперматозоидов, не видимые при светооптической микроскопии, которые мешают осуществлять оплодотворение (например, аномалия или отсутствие акросомы - ядерной шапочки, помогающей сперматозоидам проникать через оболочки яйцеклетки)
выявлять аномалии сперматозоидов, которые приводят к нарушениям развития оплодотворенной яйцеклетки (аномалии базального тельца сперматозоидов – центриоли; аномалии строения хроматина – наследственного вещества сперматозоидов; наличие внутриклеточного вирусного инфицирования сперматозоидов)
выявлять генетически обусловленные аномалии сперматозоидов, которые не корректируются терапевтически и имеется риск наследования аномалии, Так, например, ЭМИС позволяет выявлять структуру центриоли сперматозоидов. Этот органоид у человека наследуется по отцовской линии, его аномалии приводят к нарушению дробления эмбриона. Тотальные аномалии центриоли выявляли при неудачах ИКСИ (арест развития эмбрионов на стадии бластулы).
прогнозировать результаты применения методов репродуктивных технологий (определение индекса интактных сперматозоидов с нормальной ультраструктурной организацией, которые способны обеспечивать развитие оплодотворенной яйцеклетки)
выявляють капсиды вируса простого герпеса. Существование внутриклеточного инфицирования сперматозоидов (в том числе и фракции подвижных сперматозоидов) у мужчин, не имеющих симптомов генитального герпеса, которые не обращаются по поводу генитального герпеса к клиницистам и не получают лечения, нами доказано. Это явление имеет как эпидемиологическое значение (горизонтальная передача ВПГ при бессимптомном носительстве), так и играет роль в аномалиях развития беременности
проводить контроль спермы доноров для центров репродукции, выявляя аномалии, не различимые при традиционном спермиологическом исследовании
Видео-ролик: Процедура ЭКО
В данном ролике показана процедура проведения ЭКО, которая состоит в прибавлении подготовленной фракции наиболее быстрых и морфологически нормальных сперматозоидов к яйцеклеткам, находящихся в составе комплекса с клетками кумулюса. В начале ролика за счет изменения глубины резкости обнаруживают ооциты в составе комплекса клеток кумулюса, затем в посуду для культивирования вносят определенное количество сперматозоидов, которые начинают свое движение между клетками кумулюса к яйцеклетке. Оценку результатов оплодотворения яйцеклеток проводят на следующее утро.
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологииимени академика В.И. Кулакова"
Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации
Адрес: 117997, г. Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Информационный центр: (495) 531-4444